用(yòng)二氯甲烷抽提血清TG，同時(shí)加入矽酸去除磷脂、遊離甘油、甘油一酯、部分(fēn)甘油二酯及蛋白。TG經氫氧化(huà)鉀皂化(huà)生成甘油，酸化(huà)後以過碘酸氧化(huà)甘油産生甲醛，用(yòng)亞砷酸還(hái)原過剩的(de)過碘酸後，甲醛與變色酸在硫酸溶液中加熱(rè)産生紫紅色反應，進行比色測定。本法根據Van Handel等( 1957) 及Carlson法( 1963)改進而來(lái)。
1.抽提試劑
( 1)二氯甲烷( HPLC級)。
( 2)生理(lǐ)鹽水(shuǐ)。
( 3)矽酸:用(yòng)去離子水(shuǐ)洗3次，去除細顆粒，然後用(yòng)甲醇洗2次，用(yòng)布氏漏鬥( Whatman #42濾紙)過濾，空氣幹燥。用(yòng)前置65℃幹燥箱烘幹至少72小時(shí)，幹燥器内貯存。
2.皂化(huà)試劑 ( 1) 0.25% KOH乙醇液:
制備5% KOH水(shuǐ)溶液100ml，取5ml用(yòng)無水(shuǐ)乙醇稀釋至100ml，臨用(yòng)當天配制，用(yòng)超聲波去氣泡。
( 2) 0.1mol/L H2SO4:
濃H2SO46.0ml用(yòng)蒸餾水(shuǐ)稀釋至1L。
3.氧化(huà)、還(hái)原、顯色試劑過碘酸鈉( NaIO4) :
将1.34g NaIO4溶于1L蒸餾水(shuǐ)中。
( 2)亞砷酸鈉( As2O3) :
将11.25g NaOH溶于約100ml蒸餾水(shuǐ)中，未冷(lěng)卻前加入25g As2O3，最後用(yòng)蒸餾水(shuǐ)稀釋成250ml。
( 3)變色酸顯色劑
1) 4mol/L H2SO4:将濃H2SO4444ml慢(màn)慢(màn)地加入至1500ml蒸餾水(shuǐ)中，在冰水(shuǐ)浴中配制，待完全冷(lěng)卻後，加水(shuǐ)至終體積2L。
2)顯色劑: 400ml蒸餾水(shuǐ)中，加入5g變色酸，加入4mol/L H2SO4至2L。
4.标準液
标準物(wù)質爲三油酸酯及三軟脂酸酯。
( 1)貯存液(含2mg/L)
1)稱三油酸酯200mg，溶于二氯甲烷至100ml。
2)稱三軟脂酸酯100mg，溶于二氯甲烷至50ml。
将上述兩液按2∶1的(de)比例充分(fēn)混合，此液含TG 2.327mmol/L。
( 2)工作液:
由貯存液稀釋至所需濃度。
( 3)劑量響應曲線:
工作液( S1～S5)各10ml，分(fēn)别加入矽酸2g、生理(lǐ)鹽水(shuǐ)0.5ml後，與标本同樣處理(lǐ)，繪制劑量響應曲線。線性範圍超過3.723mmol/L則不可(kě)靠。任何标本值高(gāo)于此水(shuǐ)平時(shí)，應稀釋後重新操作。
( 4)穩定性:
标準貯存液與工作液應放置4℃冰箱中，用(yòng)帶塞的(de)容器，以特氟隆( Teflon)條密封，每次取用(yòng)後應立即加蓋，并及時(shí)放進冰箱，可(kě)穩定6個(gè)月(yuè)。超過6個(gè)月(yuè)，因溶劑揮發可(kě)導緻标準讀數值增高(gāo)。
