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電熱(rè)恒溫培養箱和(hé)CO2培養箱在體外細胞培養中的(de)使用(yòng)

體外培養的(de)細胞與體内細胞一樣,需要在合适的(de)溫度和(hé)pH下(xià)生存。培養工作既可(kě)在培養箱(culture incubator)中進行,也(yě)可(kě)在控溫溫室中進行,若一或兩台培養箱就能滿足需要,那麽用(yòng)培養箱是相對(duì)經濟且節省空間的(de)最好途徑。常用(yòng)的(de)培養箱包括電熱(rè)恒溫培養箱、濕式CO2培養箱和(hé)厭氧培養箱

1.電熱(rè)恒溫培養箱

培養箱要具有較高(gāo)的(de)溫度靈敏度。一般選購(gòu)隔水(shuǐ)式或晶體管式控溫培養箱,該培養箱靈敏度高(gāo),溫度控制較恒定。根據工作原理(lǐ)可(kě)将電熱(rè)恒溫培養箱分(fēn)爲隔水(shuǐ)式和(hé)氣套式兩種。電熱(rè)恒溫培養箱價格較便宜,但隻适于細菌培養和(hé)封閉式細胞培養,并常用(yòng)于有關細胞培養器材和(hé)試劑的(de)預溫和(hé)恒定。

2.CO2培養箱

CO2培養箱是細胞培養水(shuǐ)平提高(gāo)和(hé)培養器皿多(duō)樣化(huà)後提出的(de)高(gāo)要求産物(wù),它除有恒溫培養箱的(de)性能外,還(hái)能夠恒定供應細胞培養時(shí)所需要的(de)CO2(一般濃度5%),維持培養液酸堿度穩定,适于開放或半開放培養。此外,還(hái)具有殺菌、安全等其他(tā)完善的(de)輔助功能,故在動物(wù)細胞培養、病毒增殖、細菌培養中被廣泛采用(yòng)。CO2培養箱種類繁多(duō),根據工作原理(lǐ),可(kě)分(fēn)爲氣套式CO2培養箱、水(shuǐ)套式CO2培養箱、紅外CO2培養箱、高(gāo)溫滅菌培養箱、光(guāng)照(zhào)低溫培養箱、恒溫恒濕培養箱等。CO2培養箱價格較貴,但使用(yòng)方便,CO2分(fēn)壓和(hé)溫度容易控制。CO2濃度通(tōng)過CO2檢測裝置控制,空氣通(tōng)過自然對(duì)流在培養箱内循環,以保持CO2水(shuǐ)平和(hé)溫度均一。當使用(yòng)不透氣瓶蓋培養瓶時(shí),可(kě)将瓶蓋稍微旋松,使之與外界保持通(tōng)氣狀态,因此培養箱内空氣必須保持清潔。爲避免污染,要定期用(yòng)紫外線燈照(zhào)射或者75%乙醇擦拭對(duì)培養箱進行消毒。另外,要維持箱内溫度、濕度恒定,可(kě)用(yòng)無菌蒸餾水(shuǐ)定期注入外箱内,或将無菌潮濕的(de)紗布置于托盤内,然後放入CO2培養箱,使箱内始終保持穩定的(de)相對(duì)濕度,防止培養液蒸發而影(yǐng)響細胞的(de)生長(cháng)。

培養箱大(dà)小的(de)選擇由使用(yòng)人(rén)數和(hé)培養物(wù)類型決定。當多(duō)人(rén)同時(shí)進行細胞培養時(shí),可(kě)以選用(yòng)一個(gè)中型培養箱(可(kě)同時(shí)放置1 000個(gè)細胞培養闆,或存放完成10次實驗所需要的(de)培養物(wù))。若人(rén)員(yuán)較少,則一台小型培養箱就可(kě)滿足需要。CO2培養箱,特别是有加濕器的(de)CO2培養箱必須經常清洗。所以,内部應易于拆卸,不留難以清潔的(de)縫隙和(hé)死角。培養物(wù)從培養箱取到潔淨台或其他(tā)無菌台使用(yòng)時(shí),應用(yòng)酒精擦拭培養瓶、培養皿或裝它們的(de)箱子,然後再進行下(xià)一步操作。


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